TMAO檢測(cè)
TMAO及相關(guān)代謝物定量分析
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氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO),又稱三甲胺氧化物,是三甲胺形成的N-氧化物。氧化三甲胺是一種飼料添加劑,廣泛使用于魚、禽等的飼養(yǎng),可以促進(jìn)肌肉生長(zhǎng),也是水產(chǎn)品體內(nèi)自然存在的內(nèi)源性物質(zhì),是魚的新鮮度的生化指標(biāo)。魚體內(nèi)的TMAO經(jīng)厭氧菌分解可釋放出三甲胺(TMA),具有難聞的魚腥味,所以TMA含量越高,越不新鮮。這就是魚剛出水時(shí)沒(méi)什么不良?xì)馕叮胖靡粫?huì)即有腥臭味的根本原因。在人體內(nèi),腸道菌群可以利用富含膽堿或三甲胺結(jié)構(gòu)的物質(zhì),如磷脂酰膽堿(phosphatidyl choline,PC)、左旋肉堿等,產(chǎn)生TMAO。蛋類、牛奶、肝臟、紅肉、貝類以及魚類含有豐富的PC,PC 是 TMAO 形成的最主要食物來(lái)源。左旋肉堿化學(xué)結(jié)構(gòu)類似于膽堿,含有類似膽堿的三甲胺結(jié)構(gòu),且其在紅肉(如豬瘦肉、羊肉、牛肉等)中含量豐富氧化三甲胺(Trimetlylamine oxide,TMAO)是一種廣泛存在于自然界水產(chǎn)品體內(nèi)的小分子化合物,亦存在于哺乳動(dòng)物、植物、真菌中,可參與機(jī)體多種重要的生物學(xué)功能,如滲透調(diào)壓、維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)等。近年來(lái),隨著腸道菌群研究的深入,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)TMAO及相關(guān)代謝物水平與心血管疾病、心肌梗死、卒中、糖尿病、慢性腎病、癌癥等多種疾病密切相關(guān),因此TMAO越來(lái)越受到廣泛關(guān)注,相關(guān)研究多有報(bào)道。TMAO及相關(guān)代謝物的完全定量分析可為相關(guān)疾病的診斷及預(yù)測(cè)、病因病機(jī)研究、療效評(píng)估等方面提供可靠的依據(jù)。
TMAO在人體代謝過(guò)程
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??在人體中,TMAO主要來(lái)源于腸道菌群對(duì)三甲胺(Trimethylamine,TMA)的氧化,腸道微生物將攝入的卵磷脂(Lecithin)、膽堿(Choline)等營(yíng)養(yǎng)素代謝并產(chǎn)生TMA,TMA通過(guò)門脈循環(huán)進(jìn)入肝臟,在肝臟經(jīng)過(guò)黃素單氧化酶3(Flavin monooxygenase,F(xiàn)MO3)或其他黃素單氧酶(FMOx)氧化生成TMAO。TMAO其前體還包括包括肉堿(Carnitine)、甜菜堿(Betaine)、肌酸酐(Creatinine)等。
我們采用UHPLC-QQQ/MS技術(shù)平臺(tái)可對(duì)三甲胺N-氧化物(TMAO),三甲胺(TMA),膽堿,甜菜堿,肌酐,左旋肉堿絕對(duì)定性定量分析,確保多種同分異構(gòu)體獲得較好的分離,并采用具有代表性的同位素作為內(nèi)標(biāo)校正,顯著提高定性定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性。本方法具有優(yōu)異的靈敏度、精密度、重復(fù)性及準(zhǔn)確性,可用于探索TMAO在各種疾病中的病因?qū)W、發(fā)病機(jī)理中所發(fā)揮的作用,挖掘其在疾病診斷、治療及預(yù)后過(guò)程中的重要價(jià)值。
分析樣本類型
主要包括血清、糞便、尿液、組織及腸道內(nèi)溶物等;
樣本最低收集量:血液、膽汁等僅需50uL,組織、糞便等50mg即可。